ABSTRACT
La infección por Neisseria meningitidis del grupo B ha sido difícil de detectar, en parte porque el polisacárido de este grupo de bacterias es un inmunógeno débil. En este artículo se describe el análisis de la validez de una nueva prueba, la MB-Dot-ELISA, en la cual se emplea un antisuero de caballo de alta titulación para detectar antígenos de N. meningitidis del grupo B. En el estudio se valoraron muestras de líquido cefalorraquídeo de 585 personas, 574 de las cuales padecían presuntamente meningitis y 11, trastornos neurológicos. La sensibilidad de la prueba fue 0,991 y la especificidad, 0,826. Estos valores fueron más altos que los de la aglutinación en látex y son muy compatibles con los de la contrainmunoelectroforesis y los métodos de análisis bacteriológico. La prueba MB-Dot-ELISA es sensible, barata y apropiada para realizar investigaciones en los laboratorios de salud pública
Infection with Neisseria meningitidis group B has been difficult to detect, partly because this bacterial group's polysaccharide is a weak immunogen. This article describeswork carried out to test a new procedure (MB-Dot-ELISA) employing a high-titered horse antiserum for detection of N. meningitidis group B antigens. The study assayed cerebrospinal fluid samples from 585 subjects, 574 with suspected meningitis cases and 11 with neurologic disorders. The results of the assay indicated a sensitivity of 0.991 and a specificity of 0.826. These results were superior to those obtained with latex agglutination and in substantial agreement with the results of counterimmunoelectrophoresis and bacteriologic methods. Overall, the MB-Dot-ELISA was found to be sensitive, inexpensive, and suitable for public health laboratory investigations.
Subject(s)
Humans , Male , Female , Meningitis, Bacterial/diagnosis , Clinical Laboratory Techniques , Neisseria meningitidis/isolation & purification , Microbial Sensitivity Tests , Sensitivity and Specificity , Data Interpretation, StatisticalABSTRACT
Imunoeletroforese cruzada (IEC) foi empregada para pesquisar a presença de antígeno de Neisseria Menigitidis grupo B em 185 amostras de líquido cefalorraquidiano (LCR) e/ou 125 amostras de soro. Dentre as amostras de LCR, 103 (55,7 por cento) foram positivas apenas através da cultura e 36 (19,5 por cento) apenas na reaçäo de IEC. Em 34 (18,4 por cento) destas amostras, ambos os métodos apresentaram resultados positivos. Nos casos em que a cultura foi negativa, a IEC em amostras de LCR e/ou soro contribuiu para o diagnóstico da doença meningocócica grupo B em 26,7 por cento dos casos, sendo que em 99,1 por cento deles já havia sido iniciada terapia antibacteriana. Considerando os resultados positivos obtidos apenas na IEC do soro, foi observada uma percentagem de 5,6 por cento. A contribuiçäo da IEC em LCR e/ou soro foi significativa
Subject(s)
Immunoelectrophoresis, Two-Dimensional , Cerebrospinal Fluid , Neisseria meningitidis , InfectionsABSTRACT
Um total de 326 amostras de líquido cefalorraquidiano de pacientes com evidência clínica de meningite foi estudado empregando-se um reagente de látex comercial para demonstrar a presença de antígenos bacterianos. As amostras de líquido cefalorraquidiano eram purulentas ou turvas e foram pesquisados antígenos de Neisseria meningitidis, grupos B e C, Haemophilus influenzae b e Streptococcus pneumoniae. Os resultados da detecçäo de antígenos bacterianos através do reagente de látex mostraram um melhor desempenho deste método em comparaçäo à cultura para Neisseria meningitidis grupos B e C e para Streptococcus pneumoniae. Excluindo Streptococcus pneumoniae, para o qual näo foi realizada a imunoeletroforese cruzada, o desempenho do látex mostrou-se superior à imunoeletroforese cruzada apenas para Neisseria meningitidis grupo B. A comparaçäo de resultados do teste de látex com os obtidos através de culturas revelou índice máximo de sensibilidade para Neisseria meningitidis grupo B e para Spreptococcus pneumoniae. Comparando os resultados com os obtidos de imunoeletroforese cruzada, os maiores níveis de sensibilidade foram observados para Neisseria meningitidis grupo B, e para Haemophilus influenzae b. Com relaçäo à especificidade, os valores foram satisfatórios para todos os agentes bacterianos pesquisados, em relaçäo aos outros dois métodos diagnósticos, exceçäo da imunoeletroforese cruzada para Streptococcus pneumoniae que näo foi analisada. O índice de concordância Kappa(K) demonstrou melhores índices K para Haemophilus influenzae b quando comparado com a cultura, e melhores índices K também para este agente bacteriano e para Neisseria meningitidis grupo C, quando os resultados da aglutinaçäo de látex foram comparados com o método de imunoeletroforese cruzada
Subject(s)
Immunoelectrophoresis, Two-Dimensional , Meningitis, Bacterial/diagnosis , Antigens, BacterialABSTRACT
Oitenta amostras purulentas de liquido cefalorraquidiano (LCR) de pacientes com evidencia clinica de meningite foram estudadas empregando-se Kit Directigen de aglutinacao de latex (AL) para demonstrar antigeno bacteriano no LCR. Os resultados modtraram que o teste de AL apresentou melhor desempenho diagnostico do que bacterioscopia atraves da coloracao de Gram, cultura e imunoeletroforese cruzada (IEC) em relacao a Neisseria meningitidis grupos b e C, e ao Haemophilus influenzae tipo b, e melhor do que coloracao de Gram e cultura quando Streptococcus pneumoniase foi avaliado...
Subject(s)
Humans , Antigens, Bacterial/analysis , Meningitis, Meningococcal/cerebrospinal fluid , Neisseria meningitidis/immunology , Meningitis, Meningococcal/diagnosis , Latex Fixation Tests/methodsABSTRACT
Dot-ELISA para deteccao de antigenos polissacaridicos de pneumococos foi padronizado em vista da necessidade de se ter um diagnostico rapido e eficaz para pneumonia pneumococica aguda. Um total de 480 amostras de liquido pleural sendo 442 de criancas com diagnostico clinico e laboratorial de pneumonia bacteriana e 38 de pacientes com tuberculose, mais 20 amostras dos soros sanguineos de criancas sadias foram avaliados no Dot-ELISA. As amostras foram tratadas previamente a 90ºC por 10 min com EDTA 0,1 M de pH 7,5 e aplicadas sobre membrana de nitrocelulose. Para a deteccao de antigeno pneumococico foi empregado omniserum pneumococico diluido a 1:200. Os resultados de Dot-ELISA avaliados em comparacao com os resultados de cultura bacteriana, contra-imunoeletroforese e latex-aglutinacao apresentaram indices de 0,940 para a sensibilidade, 0,830 para especificidade e 0,760 para concordancia. Omniserum pneumococico mostrou ser um otimo soro polivalente para a deteccao de antigenos pneumococicos em Dot-ELISAe, essa tecnica provou se uma alternativa pratica e eficaz para o diagnostico de pneumonias pneumococicas.